─=≡Ξ║ علوم آزمایشگاهی ║Ξ≡=─
صفحات وبلاگ
نویسنده: افضل نیا - چهارشنبه ٢٤ اردیبهشت ۱۳٩۳

در ذیل مواد مختلفی که ممکن است در ادرار دیده شود و نیز شایعترین ععل هر مورد را ذکر میکنیم:

گلبولهای قرمز:تروما،پیلونفریت،سل دستگاه ادراری تناسلی،سیستیت،پروستاتیت،سنگهای ادراری،تومورها(خوش خیم و بدخیم)،اختلال انعقادی و علل دیگر که مربوط به وجود خون در ادرار می شود از قبیل:خون قاعدگی در زنان،کلیه های پلی سیستیک،نفریت بینابینی،کم خونی همولتیک،واکنش نسبت به تزریق خون،سوختگی.
گلبولهای سفید:عفونت در هر قسمت از دستگاه تناسلی،سل،تومورهای کلیوی،گلومرونفریت حاد،در معرض اشعه قرار گرفتن،نفریت بینابینی(در اثر سوءمصرف داروهای مسکن).
سلولهای اپیتلیال:نکروز حاد توبولی،التهاب نکروز دهنده پاپیها(Necrotizing Papillitis) ،البته در اکثر موارد منشا سلولهای اپیتلیال در ادرار مجرای ادراری است و لذا اهمیت بالینی ندارد.
انگلها:تریکوموناس واژینالیس،شیستوزوماهماتوبیوم.
قارچها:
کاندیدا آلبیکانس(به خصوص در دیابتی ها،بیماران دچار سرکوب ایمنی یا افرادی که عفونت قارچی واژن دارند).
اسپرماتوزوآ:به صورت طبیعی بعد از مقاربت یا احتلام شبانه در ادرار دیده می شود.
کریستالها:به دو گروه تقسیم می شوند:
1)کریستالهای غیرطبیعی:سیستین(Cystine)،سولفونامید،لوسین،تیروزین،کلسترول.
2)کریستالهای طبیعی:به دو گروه تقسیم می شوند:
الف)در ادرار اسیدی:اگزالات کلسیم(به شکل کریستالهای چهرگوشی است که در مرکز آنها یک ضربدر دیده می شود)،اسید اوریک.
ب)در ادرار قلیایی:کربنات کلسیم،تریپل فسفات(شبیه در تابوت است).
آلودگیهای اتفاقی نمونه ادرار:الیاف پنبه،مو،فیبرهای چوب و مواد بی شکل(آمورف)که البته هیچ کدام اهمیتی ندارند.
موکوس:در صورتی که مقادیر زیادی موکوس مشاهده شود،بیماریهای مجرا مطرح می شوند(Urethral Disease).
سلولهای Glitter:گلبولهای سفیدی هستند که در محلول هیپرتون لیز شده اند.
کستها(Casts):مشاهده کست در ادرار وجود بیماریهایی را مطرح می کند که کاملا یا در قسمتی از پروسه خود کلیه را درگیر می سازند.انواع کستهای ادراری عبارتند از:
1-کست هیالین:فقط در صورتی قابل قبول است که به تعداد زاید(numerous)گزارش شود و مطرح کننده افزایش فشارخون خوشخیم و سندرم نفروتیک است.
2-کست گلبول قرمز(RBC Cast):گلومرونفریت حاد،نفریت لوپوسی،آندوکاردیت تحت حاد باکتریایی،بیماری گود پاسچر(GoodPastures) گلومرونفریت بعد از عفونت استرپتوکوکی (PSGN) و واسکولیت،افزایش فشارخون بدخیم.
3-کست گلبول سفید(WBC Cast):پیلونفریت.
4-کست سلولهای اپیتلیال:ضایعات توبولی،نفروتوکسین،ویروس.
5-کست دانه های گرانولر(Granular Cast):شکستن کستهای سلولی منجر به ایجاد این کستها می شود و خود این کستها نیز به کستهای مومی (Waxy Casts) تبدیل می شوند.
6-کست مومی(Waxy):(مرحله انتهایی کست گرانولر) بیماری مزمن پیشرفته کلیوی،آمیلوئیدوز.
7-کست چربی:سندرم نفروتیک،دیابت قندی،تخریب سلولهای توبولهای کلیوی.
8-کست پهن(Broad): بیماری مزمن کلیوی

نویسنده: افضل نیا - چهارشنبه ٢٤ اردیبهشت ۱۳٩۳

کتونها موادی هستند که در مواردی که بدن شما قادر نباشد انرژی کافی از قند به دست آورد و مجبور می شود از چربی ها وبرای تامین انرژی مورد نیاز خود استفاده کند ساخته می شوند. هنگامی که انسولین کافی برای ورود گلوکز به درون سلولها وجود نداشته باشد بدن اجبارا چربی ها را شکسته و از آنها بعنوان منبع انرژی خود استفاده می نماید.این اسید های چرب اضافی در کبد به "اجسام کتون" از جمله "استون" تبدیل می شوند. ا اجسام کتونی در عین حال که به عنوان سوخت مورد استفاده سلول های بدن مخصوصاً سلول های مغزی قرار می گیرند، خاصیت اسیدی نیز دارند و تجمع آنها در خون منجر به وضعیتی می شود که به "کتواسیدوز دیابتی" معروف است. در این حالت علاوه بر خون در ادرار نیز اجسام کتونی دیده می شود.اکثر بیماران فکر می کنند که کتواسیدوز دیابتی تنها در شروع دیابت نوع 1 تظاهر می کند در حالی که آمار نشان می دهند درصد بالایی از بیماران دیابتی بستری شده به علت کتواسیدوز قبلاً به دیابت مبتلا بوده اند. پیشرفت کتواسیدوز به طور تدریجی و ظرف چند ساعت صورت می گیرد. در واقع اجسام کتونی حدود 12-4 ساعت بعد از ظاهر شدن در ادرار، در خون تجمع پیدا می کنند. به همین خاطر است که تشخیص زود هنگام کتواسیدوز از طریق انجام آزمایش کتون ادرار اهمیت بسیار زیادی برخوردار است.

دیابت کنترل نشده، رژیم بدون کربوهیدرات، گرسنگی شدید یا بیماری‌هایی مثل آنورکسیا و مصرف الکل باعث حضور کتون در ادرار می‌شوند. مصرف بیش از حد آسپیرین، استفراغ طولانی‌مدت و بیماری‌های تب‌دار در کودکان هم حضور کتون در ادرار را به دنبال دارند.

علائم هشدار دهنده کتواسیدوز عبارتند از:

احساس خستگی و تشنگی دائم، پوست خشک و برافروخته، حالت تهوع، استفراغ، درد شکم، تنفس غیر طبیعی (سریع و عمیق)، استشمام بوی استون از دهان، احساس گیجی، کاهش سطح هوشیاری و در موارد شدید بیهوشی کامل و کما.

کتواسیدوز یکی از اورژانس های دیابت است و احتمال وقوع آن در افراد مبتلا به هر دو نوع دیابت 1و 2 وجود دارد (البته در دیابت نوع 2 این احتمال کمتر است). بنابراین لازم است تا این افراد با اصول پیشگیری از کتواسیدوز آشنا باشند و آنها را دقیقاً رعایت کنند. یکی از مهم ترین این اصول اندازه گیری کتون ادرار است.

نحوه جستجوی مواد کتونی در ادرار

از چندین روش برای جستجوی مواد کتونی در ادرار می توانید استفاده کنید. ساده ترین این روشها عبارت است از استفاده از نوارهایی که در ادرار فرو برده شده و سپس تغییر رنگ ایجاد شده در نوار تفسیر می شود.اجسام کتونی ادرار شامل اسیداستواستیک(20%) بتاهیدروکسی بوتیریک اسید(78%) و استون (2%) می باشد.
واکنش تشخیص کتون در نوار ادراری با معرف نیتروپروسید و یک بافر قلیایی صورت می گیرد.در این حالت فقط اسید استواستیک است که قادر است در مجاورت معرف رنگ شاه بلوطی حاصل کند.

 

نویسنده: افضل نیا - یکشنبه ۱ اردیبهشت ۱۳٩٢

بعضی از تغییرات فیزیولوژیک و نیز پاتولوژیک وجود دارند که عامل ایجاد کننده آن یا نامشخص و یا اینکه بسیار متعدند از آن جمله افزایش گلبولهای سفید گرانول‌دار ائوزونوفیل هستند. ائوزینوفیلی می‌تواند به زمانی اطلاق شود که تعداد ائوزینوفیلها بیش از 400 عدد در میلیمتر مکعب خون باشد مکانیسم این افزایش مشخص نیست. زیادی ائوزینوفیلها ممکن است در طی یک آزمایش خون بطور اتفاقی معلوم شود و پزشک بعد از آن تصمیم می‌گیرد که چه عمل درمانی را بستگی به علت بیماری در پیش بگیرد.

سلول ائوزینوفیل

ائوزینوفیلها بطور طبیعی 2 درصد لکوسیتها را تشکیل می‌دهند. این سلولها اهمیت قابل ملاحظه‌ای در حفاظت بدن در برابر عفونتها دارند. این سلولها دارای گرانولهای فراوان هستند و این گرانولها بوسیله ائوزین یا فلوکسین Floxine رنگ می‌گیرند و بزرگتر از گرانولهای نوتروفیلی هستند. این سلولها ، سلولهای فاگوسیتی هستند اما این خاصیتشان کمتر از نوتروفیلهاست ائوزینوفیلها کمپلکس آنتی ژن و آنتی بادی را منهدم می‌کنند و بر علیه انگلها مبازه می‌کنند یکی از عفونتهای انگلی ، شیستوزومیاز نام دارد که ائوزینوفیلها به اشکال جوان انگل چسبیده و بسیاری از آنها را می‌کشند. تعداد ائوزینوفیلها در خون در ساعات مختلف روز متفاوت است. در افراد سالم بیشترین مقدار معمولا در ساعت 3 صبح می‌باشد اما بهرحال کمتر از 400 در میلیمتر مکعب خون است.


ادامه مطلب ...
نویسنده: افضل نیا - پنجشنبه ٢۸ دی ۱۳٩۱

روش تهیه معرف های VP

- تهیه آلفا نفتول (معرفA):

پودرآلفا نفتول: g 5

اتانول: cc100

 

-تهیه  KOH(پتاس) (معرفB):

KOH:g 40

کراتین (cr): g 3/0

آب‌مقطر: cc100

معرف ها در ظروف تیره و در یخچال نگهداری می‌شوند. چون دارای پایداری متغیر هستند لازم است به طور هفتگی (بر حسب میزان کار) کنترل کیفی گردند.

 

روش تهیه معرف متیل رد (MR)

پودر متیل رد= g 1/0

اتانول=cc 300

پودر متیل رد را در اتانول حل کرده سپس با آب‌ مقطر حجم آنرا به cc500 برسانید. معرف در ظرف تیره و در یخچال نگهداری می‌شود. چون دارای پایداری متغیر است، لازم است بطور هفتگی (بر حسب میزان کار) کنترل کیفی گردد.

 

روش تهیه معرف کواکس

P-دی متیل آمینو بنز آلدئید= g10

آمیل الکل: cc150

اسید کلریدریک غلیظ و تازه: cc50

 

دی متیل آمینو بنزآلدئید را به آمیل الکل اضافه نموده و به آرامی اسید کلریدریک را به آنها اضافه نمایید. برای تهیه این معرف از هود استفاده نمایید. معرف در ظروف تیره و در یخچال نگهداری می شود. چون دارای پایداری متغیر است، لازم است بطور هفتگی (برحسب میزان کار) کنترل کیفی گردد.

روش تهیه معرف کلرور فریک

کلرور فریک= g10

آب‌ مقطر = cc100 (روش غیر اسیدی)

(روش دیگر تهیه این معرف شامل کلرور فریک:g 12، اسید کلریدریک غلیظ:cc 5/2 و آب ‌مقطرcc 100 می‌باشد، که این روش، روش اسیدی است). معرف در ظروف تیره و در یخچال نگهداری می‌شود. چون دارای پایداری متغیر است، لازم است بطور هفتگی (برحسب میزان کار) کنترل کیفی گردد.

روش تهیه معرف های احیاء نیترات

-تهیه معرف A:

N،N  دی متیل آلفا نفتیل آمین: g6

 اسیداستیک گلاسیالN5، (30% )cc :1000

 مقدار فوق از N، N دی متیل آلفا نفتیل آمین را در کمتر از cc1000 اسید استیک گلاسیال N5 حل کرده و کمی حرارت ملایم دهید تا حل شود. حجم را به یک لیتر رسانیده، محلول را از صافی رد کنید.

-تهیه معرف B:

سولفانیلیک اسید (P- آمینو بنزن سولفونیک اسید): g8

اسیداستیک گلاسیال N5، (30% ): cc 1000

مقدار فوق از سولفانیلیک اسید را در کمتر از cc 1000 اسیداستیک حل کرده و سپس حجم را به یک لیتر برسانید. معرف ها در ظروف تیره و در یخچال نگهداری می شوند. آلفا نفتیل آمین سرطان زا است.

 

روش تهیه معرف نین هیدرین

پودر نین هیدرین=  g5/3

استن=  cc50

بوتانول =  cc50   

استن و بوتانل را مخلوط کرده و سپس پودر نین هیدرین را اضافه نمایید. معرف در ظرف تیره و در دمای اتاق نگهداری می شود. درب آن باید کاملاً محکم بسته شود.

 

روش تهیه ویتامین K1

پودر ویتامین  =k1 g2/0

اتانول= cc20

محلول در ظرف تیره و در یخچال نگهداری می‌شود. درب ظرف باید کاملاً محکم بسته شود. غلظت نهایی محلول g/mlµ 1/0 برای محیط های مایع و g/mlµ10 برای محیط های آگاردار است. g2/0 پودر ویتامین K1 را روی یک قطعه کوچک فویل آلومینیومی استریل وزن کرده و در شرایط آسپتیک به ml20 اتانول در یک بطری استریل اضافه کنید. برای رقیق سازی بیشتر از آب‌ مقطر استریل استفاده کنید. محلول ذخیره  mg/ml10 است. ml1 از محلول ذخیره را به یک لیتر آگار و ml/l 01/0 براث اضافه کنید. محلول را دور از نور و در یخچال ذخیره کنید.

روش تهیه همین(Haemine)

پودر همین= g 5/0    

سود (NaOH)N 1= cc10

مقدار فوق از پودر همین را به cc10سود 1 نرمال اضافه کرده و حل کنید، سپس با آب ‌مقطر به حجم cc100برسانید. در شرایط 15 دقیقه، oC121، فشار  Lb15 در اتوکلاو استریل ‌نمایید.

محلول در ظرف تیره و در یخچال نگهداری می شود. این محلول ذخیره mg/ml 5 غلظت دارد، ولی هنگام مصرف به عنوان ساپلمنت، باید دارای غلظت نهایی µg/ml 5 باشد.

 

روش تهیه آب اکسیژنه (H2O2) 3%

محلول آب اکسیژنه 30% را به نسبت 1:10 با آب ‌مقطر رقیق نمایید. (یعنی cc1 آب اکسیژنه 30% را به cc9 آب‌مقطر اضافه ‌نمایید). محلول در ظرف تیره و در یخچال نگهداری می شود.

روش تهیه کریستال ویوله ذخیره و اگزالات آمونیوم ذخیره

-تهیه کریستال ویوله

پودر کریستال ویوله = g20

اتانول= cc100

-تهیه اگزالات آمونیوم

پودر اگزالات آمونیوم= g1

آب‌ مقطر= cc100

هنگام مصرف، محلول کریستال ویوله ذخیره را به نسبت 1:10 با آب‌ مقطر رقیق ‌نمایید.
(cc1 از محلول کریستال ویوله و cc 9 آب‌ مقطر) سپس این محلول را با چهار حجم از
محلول اگزالات آمونیم رقیق کنید (cc1 محلول کریستال ویوله رقیق شده و cc4 اگزالات آمونیم).

محلول ذخیره و مصرفی کریستال ویوله، در ظرف تیره و در دمای اتاق نگهداری می‌شود.

 

روش تهیه لوگل

ید= g1

یدور پتاسیم =g 2

آب ‌مقطر= cc240

محلول آبی بیکربنات سدیم5%= cc60

در مقدار کمی از آب‌ مقطر، ید و یدور پتاسیم را کاملاً حل نمایید، بعد حجم را با آب‌ مقطر به cc240‌ برسانید. محلول 5% بیکربنات سدیم (بیکربنات سدیم: g5   آب ‌مقطر: c100) را نیز به آن اضافه ‌نمایید. محلول در دمای اتاق نگهداری می شود . درب آنرا باید کاملا" محکم ببندید.

روش تهیه محلول الکل-استون

اتانول= cc250

استون= cc250

حجم مساوی از الکل اتیلیک (اتانول) را با استون مخلوط نمایید.

 

روش تهیه فوشین/ یا سافرانین ذخیره

پودر فوشین= g2

اتانول= cc100

و یا

پودر سافرانین= g5/2

اتانول= cc100

به هنگام مصرف، محلول ذخیره فوشین یا محلول ذخیره سافرانین را به نسبت 1:10 با آب‌ مقطر رقیق نمایید. محلولها در ظروف تیره، تهیه و در دمای اتاق ذخیره می شوند.

نویسنده: افضل نیا - پنجشنبه ٢۸ دی ۱۳٩۱

1-        هدف: 

تهیه محیط های کشت استریل جهت رشد و جداسازی سویه های میکروبی از نمونه های مربوط به بیمار

2-      تعاریف و اصطلاحات:

شرایط آسپتیک: ایجاد شرایط سترون با کار کردن در کنار شعله و رعایت نکات لازم جهت جلوگیری از آلودگی نمونه

3-      شرح اقدامات:

3-1)  آب:

آب مورد استفاده باید دارای کیفیت مناسب باشد، یعنی عاری از موادی باشد که می توانند از رشد میکروارگانیسم ها جلوگیری کنند (یونهای فلزی سمی مثل مس) یا در شرایط آزمایش بر رشد آنها تاثیر بگذارند. آب خوب و تازه باید از راه تقطیر یا دیونیزاسیون تهیه شود. برای نگهداری آب مقطر باید از ظروفی استفاده شود که از مواد خنثی تهیه شده اند (شیشه خنثی، پلی اتیلن و غیره). ضریب هدایت آب باید کمتر از μs 15 باشد.pH  آب معمولا" کنترل نمی  شود مگر آنکه مشکلی در pH محیط های کشت تهیه شده بوجود آید. ممکن است آب دارای مقادیر زیادی میکروارگانیسم باشد، بنابراین توصیه می شود از آبی استفاده شود که تعداد میکروارگانیسم آن کم است .


ادامه مطلب ...
مطالب قدیمی تر »
نویسندگان وبلاگ:
مطالب اخیر:
دوستان من:
کدهای اضافی کاربر :